關(guān)于Waters 凝膠色譜儀GPC凝膠滲透色譜法
更新時(shí)間：2019-10-16 點(diǎn)擊次數(shù)：2043次
Waters凝膠色譜儀GPC主要由輸液系統(tǒng)（柱塞泵）、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)系統(tǒng)（示差折光檢測(cè)器、多波長(zhǎng)UV、FTIR等）及數(shù)據(jù)采集與處理系統(tǒng)。
凝膠滲透色譜法（GPC），即尺寸排阻色譜法（SEC），或凝膠過(guò)濾色譜(GFC)法，是一種色譜技術(shù)，通過(guò)使溶解的分子經(jīng)過(guò)含有微孔填料的色譜柱，從而依據(jù)其大小進(jìn)行分離。
當(dāng)樣品被分離并從色譜柱洗脫時(shí)，可通過(guò)單的濃度檢測(cè)器（傳統(tǒng)校正）或一系列檢測(cè)器（普適校正及三重檢測(cè)）進(jìn)行表征。GPC技術(shù)用于表征天然及合成聚合物、生物聚合物、蛋白質(zhì)或納米顆粒。
當(dāng)GPC色譜分離與光散射、粘度計(jì)以及濃度檢測(cè)器相結(jié)合（三重檢測(cè)）時(shí)，可提供分子量分布、分子大小、特性粘度以及大分子結(jié)構(gòu)、構(gòu)型聚集與支化方面的信息。
根據(jù)所需凝膠體積，估計(jì)所需干膠的量。一般葡聚糖凝膠吸水后的凝膠體積約為其吸水量的2倍，例SephadexG-20的吸水量為20，1克SephadexG─200吸水后形成的凝膠體積約40ml。凝膠的粒度也可影響層析分離效果。粒度細(xì)胞分離效果好，但阻力大，流速慢。一般實(shí)驗(yàn)室分離蛋白質(zhì)采用100-200號(hào)篩目的的SephadexG-200效果好，脫鹽用SephadexG-25、G-50，用粗粒，短柱，流速快。
對(duì)載體的要求：
1.良好的化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性；
2.有一定的機(jī)械強(qiáng)度；
3.不易變形;
4.流動(dòng)阻力小；
5.對(duì)試樣沒(méi)有吸附作用；
6.分離范圍越大越好（取決于孔徑分布)等；
7.載體的粒度愈小，愈均勻，堆積的愈緊密，色譜柱分離效率愈高。
GPC載體的種類：
1.交聯(lián)聚苯乙烯凝膠
2.多孔性玻璃
3.聚乙酸乙烯酯凝膠及聚丙烯酰胺凝膠
4.木質(zhì)素凝膠等
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